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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心細(xì)胞系可傳代細(xì)胞V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)

V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)
形態(tài):成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
含量:>1x106 個(gè)/瓶
污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2024-06-13
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問(wèn)量:8213
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

一、細(xì)胞特性

  1. 細(xì)胞名稱:V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)
  2. 形態(tài):成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
  3. 含量:>1x106 個(gè)/
  4. 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
  5. 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


二、細(xì)胞接收后的處理:
1、貼壁細(xì)胞

  1. 收到T25方瓶細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們(凍存管細(xì)胞收到后直接37℃水浴復(fù)蘇或直接放置于液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存)。
  2. 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3. 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,換用新鮮的*培養(yǎng)基。
  4. 如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
  5. 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

2、懸浮細(xì)胞

  1. 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
  2. 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3. 1200rpm離心5min,棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng)。
  4. 如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
  5. 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

                      
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一、V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

  1. 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
  2. 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
  3. 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二、細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

   對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

  1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
  2. 2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
  3. 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1200RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
  4. 移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

注意事項(xiàng):
1. 收到凍存管細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
3. 細(xì)胞用途:僅供科研使用。

發(fā)貨方式:
復(fù)蘇后發(fā)貨:我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,貨期一周左右,免運(yùn)費(fèi)。(氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨)
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸):需額外增加干冰運(yùn)費(fèi),選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞,為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。(氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨)
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運(yùn)輸包裝,并選擇快捷的運(yùn)輸方式(順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞)
本公司細(xì)胞引種來(lái)源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大細(xì)胞庫(kù)、上海生化細(xì)胞所、中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)等。

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