激情欧美在线一区-激情啪啪精品一-激情啪啪精品一区二区-激情七月丁香婷婷一区二区-激情人妻另类人妻伦-激情人妻偷乱在线视频

新聞中心

News Center

當(dāng)前位置:首頁新聞中心實際操作大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)

實際操作大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)

更新時間:2022-08-18點擊次數(shù):1389
  大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞是來源于脂肪組織的干細(xì)胞,與其它成體干細(xì)胞一樣具有自我更新和多向分化的能力。人和鼠的脂肪組織均可用于分離ADSCs,其中鼠脂肪組織通常取自腹股溝處脂肪墊。
  
  大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的實驗步驟:
  
  1、10天齡到4周齡大鼠1只,麻醉處死,75%乙醇浸泡消毒3~5min。無菌條件下切開腹股溝皮膚,暴露腹股溝脂肪墊。
  
  2、鈍性剝離脂肪組織,清洗并去除筋膜組織及小血管。將脂肪墊剪碎,轉(zhuǎn)移至15mL離心管中。
  
  3、加入3~4倍體積的0.1%I型膠原酶溶液,37℃水浴振蕩約20min,直至細(xì)胞混合物成乳狀濃稠液體。期間可吹打脂肪組織,輔助消化。
  
  4、250×g,4℃,離心5min。注意離心機預(yù)冷至4℃。
  
  5、小心吸去上層油脂,注意不要破壞位于下方的膠狀沉淀。加人5mL*培養(yǎng)基,重懸沉淀,轉(zhuǎn)移到新的離心管中,再次離心5min。
  
  6、重復(fù)洗滌一次,吸去上清。
  
  7、加入8mL*培養(yǎng)基重懸沉淀,轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶中,置于37℃,5%CO2溫箱中。
  
  8、待細(xì)胞貼壁生長48h后初次觀察、換液。
  
  9、換液時通過棄去培養(yǎng)基,從而去除未貼壁的細(xì)胞。
  
  10、以后每兩天更換一次培養(yǎng)基,細(xì)胞匯合達(dá)80%-90%時,0.25%胰蛋白酶消化,按1:2或1:3比例首次傳代。
  
  大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞注意事項:
  
  1、取材時應(yīng)將組織清洗干凈,仔細(xì)剝離去除血管和筋膜組織。
  
  2、脂肪組織在剪碎的過程中不能研磨,以免破壞細(xì)胞。
  
  3、消化完后的組織在離心前把離心機預(yù)冷,使細(xì)胞更好的與油脂分離。
  
  4、用明膠或者膠原蛋白處理培養(yǎng)皿底壁,有利于細(xì)胞的貼壁生長。
主站蜘蛛池模板: 亚洲精品成人网站在线播放 | 日韩人妻无码精品久久 | 欧洲亚洲大胆张筱雨 | 日韩人妻少妇一区二区三区 | 扒开双腿被两个男人玩弄视频 | 国产av无码专区亚洲av桃花庵 | 国产精品久久一区二区三区Aⅴ | 国产成人毛片亚洲精品 | 欧美嫩交一区二区三区 | 亚洲婷婷综合色高清在线 | 人妻精品久久久久中文字幕 | 国产日产韩国视频18禁 | 亚洲av中文无码字幕色本草 | 日本在线不卡免 | 亚洲欧美丝袜精品久久 | 日本一本之道高清不卡免费 | 无线网络名称乱码 | 无码一区二区精品视频久久久 | 日韩精品无码一区二区三区不卡 | 四虎影视在线观看2413 | 国产美女白浆视频免费网站 | 国产成人无码a区电影 | 隔壁邻居大乳在线播放 | 亚洲av午夜福利精品一区 | 国产在线观看免费观看 | 国产999在线观看 | 色综合久久无码中文字幕 | 精品人人妻人人澡 | 欧美成人看片一区二区三区尤物 | 亚洲日韩欧美明星在线观看 | 国产精品99AV在线观看 | 亚洲欧美自拍另类欧美 | 伊人色综合网一区二区三区 | 亚洲国产成人资源在线观看 | WWW夜插内射视频网站 | 亚洲AV成人无码人在线观看堂 | 亚洲乱码日产精品一二三 | 性色AV乱码一区二区三区 | 午夜高清无码在线 | 国产精品国产三级在线专区 | 亚精产品一三三三菠萝蜜 |