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收到大鼠滑膜細胞后如何處理?

更新時間:2021-12-27點擊次數(shù):1568
  大鼠滑膜細胞分離自卵巢組織,卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,卵巢的位置與奉丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。
  大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成,髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。
  收到常溫細胞后如何處理?
  1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有及時與我們聯(lián)系。
  2、用酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
  3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
  4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài),建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
  5、貼壁細胞:若大鼠滑膜細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
  6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
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